"이 항체 믿어도 되나"의 답은 스펙표가 아니라 검증 데이터에 있습니다. 60-060의 실제 데이터 두 장을 그대로 보고, 각각이 무엇을 보여주는지 읽어보겠습니다.
위 그림 1은 β-Gal cDNA를 형질주입한 HEK293A 세포를 60-060 항체(1:500)와 Alexa 555 표지 2차 항체(빨강)로 면역염색하고 핵을 Hoechst(파랑)로 대조염색한 것입니다. β-Gal을 발현한 세포만 빨갛게 잡히고, 발현하지 않은 옆 세포(파란 핵만 보임)는 염색되지 않습니다. 데이터시트도 "항체가 형질주입된 세포에만 반응한다(reacts only transfected cells)"고 명시합니다 — 이것이 면역형광에서 보고 싶은 특이성입니다.
01유도한 대장균에서만 밴드가 뜬다 (웨스턴블롯)
β-Gal이 실제로 있는 레인(1: 정제 단백질, 3: 유도 추출물)에서만 116 kDa 밴드가 나오고, β-Gal 발현을 유도하지 않은 비유도 레인(2)에서는 밴드가 보이지 않습니다. 배경 밴드 없이 표적이 있는 곳에만 신호가 나오는 것 — 이게 웨스턴블롯에서 확인하려는 특이성입니다. 데이터시트에는 면역침강(IPTG 유도 대장균 추출물에서 β-Gal을 끌어내림, 1/500)과 ELISA(β-Gal 100 ng 코팅 웰에 대한 항혈청 희석 적정) 데이터도 실려 있습니다.
02규격
| 제품코드 | 60-060 | 클론 | 다클론 (rabbit polyclonal) |
|---|---|---|---|
| 아이소타입 | Rabbit IgG | 농도 | 2.0 mg/ml |
| 정제 | Protein A 정제 IgG (rabbit 항혈청) | 완충액 | PBS(−) + 50% glycerol |
| 면역원 | 전장 E. coli β-Galactosidase | 반응성 | 대장균 β-Gal · β-Gal 태그 단백질 |
| 검증 응용 | Western blot (1/1,000~1/2,000) · Immunoprecipitation (1/200~1/500) · Immunofluorescence (1/200~1/500) · ELISA (1/2,000~1/3,000) | ||
| 보관 | −20℃ | 용량 | 200 µg |
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03어디에 쓰나
- lacZ 리포터 검출 — β-Gal 또는 β-Gal 융합/태그 단백질의 발현량·위치를 단백질 수준에서 확인합니다.
- 과발현·유도 확인 — IPTG 유도(대장균)나 형질주입(동물세포) 결과를 웨스턴블롯·면역형광으로 확인.
- 면역침강 — 대장균 추출물에서 β-Gal을 끌어내린 데이터가 있습니다(1/500). β-Gal 태그 단백질의 면역침강·공동면역침강은 데이터시트에 데이터가 없어 사전 확인이 필요합니다.
X-gal과 뭐가 다른가 — X-gal은 β-Gal의 효소 활성을 파란색으로 보여주고, 이 항체는 단백질 자체를 검출합니다. 항체는 효소 활성이 아니라 단백질의 특정 부위(에피토프)를 인식하므로, 활성과 무관한 단백질의 상대적 양(적절한 대조와 함께)·분자 크기·세포 안 분포를 볼 때 씁니다. 변성·비활성 형태까지 잡히는지는 에피토프가 남아 있는지에 달려 있고, 데이터시트는 비활성 변이체를 시험하지 않았습니다.
04이 글의 제품
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