"이 항체 믿어도 되나"의 답은 스펙표가 아니라 검증 데이터에 있습니다. 1A5의 실제 데이터 두 장을 그대로 보고, 무엇을 보여주는지 읽어보겠습니다.
위 그림 1은 같은 세포를 두 가지로 본 것입니다(데이터시트 원문에 COS1과 HEK293T가 함께 적혀 있어 세포주는 불명확). 오른쪽 초록은 세포가 발현한 GFP 표지 GST-ZIPK 융합단백질의 GFP 자체 형광, 왼쪽 빨강은 그 세포를 1A5 항체로 면역염색(Texas Red 표지 항-rat IgG)한 것입니다. 데이터시트가 짚는 핵심은 항체 염색(빨강)이 GFP 형광(초록)보다 훨씬 강하다는 점입니다(원문 “much stronger”). 이 그림엔 GFP 비발현 대조 세포가 없습니다. 아래 그림 2 웨스턴블롯은 GFP-ZIPK 과발현 유무를 비교한 한 가지 조건의 특이성 자료이며, 면역형광 등 다른 응용의 특이성까지 확정하지는 않습니다. 데이터시트에 따르면 두 사진은 같은 세포를 1A5로 면역염색해 찍은 것입니다(고정 방법·촬영 순서는 적혀 있지 않음).
01과발현 세포에서만 밴드가 뜬다 (웨스턴블롯)
배경 밴드 없이 표적이 있는 레인(+)에만 밴드가 나오는 것 — 이게 웨스턴블롯에서 보고 싶은 특이성입니다. GFP(26.9 kDa)와 ZIPK(약 51–53 kDa)를 더한 예상 크기(약 78–80 kDa)와도 대체로 맞습니다.
02규격
| 제품코드 | 60-001 | 클론 | 1A5 (rat monoclonal) |
|---|---|---|---|
| 아이소타입 | Rat IgG1κ | 농도 | 1.0 mg/ml |
| 정제 | Protein A 정제 IgG (하이브리도마 배양액) | 완충액 | PBS + 50% glycerol |
| 면역원 | 정제 recombinant GFP | 반응성 | GFP · EGFP · 융합단백질 |
| 응용(데이터시트) | Western blotting (~1 µg/ml) · Immunoprecipitation · Immunocytochemistry · ChIP · ELISA | ||
| 보관 | −20 ℃ | 용량 | 100 µg |
03이 항체를 쓴 논문
- Okazaki K. et al. Nuclear localization signal in a cancer-related transcriptional regulator protein NAC1. Carcinogenesis 2012;33(10):1854-62. — IP
- Maehara K. et al. Tissue-specific expression of histone H3 variants diversified after species separation. Epigenetics Chromatin 2015;8:35. — ChIP
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04고를 때
IP·ChIP처럼 논문 사용례가 있는 실험이면 단클론 1A5(60-001)가 우선 후보입니다. IHC가 필요하거나 YFP 등 다른 Aequorea GFP 변이체까지 잡아야 하면 다클론 rabbit 혈청(60-011, 데이터시트 응용: WB·IP·IF/IHC)이 대안입니다. 어느 쪽이든 실험 전 자기 시스템에서 한 번 확인하고 시작하십시오.
05이 글의 항체
더랩케미칼 · BioAcademia 정품 · 영문 데이터시트(PDF) 제공.